腹泻性贝类毒素检测试剂盒直接竞争性酶联免疫原理检测样品中的冈田酸。微孔中包被有羊抗兔冈田酸抗体(二抗)。标准品/样品中的冈田酸与冈田酸酶标物竞争冈田酸抗体上的结合位点,加入包被二抗的微孔中后,冈田酸抗体与二抗结合。孵育后洗涤微孔。然后加入底物试剂,与冈田酸酶标物发生反应,使溶液变为蓝色,加入终止液后,溶液由蓝色转变为黄色。在450nm处测量吸光值,将未知样品的吸光值与标准品的吸光值相比,即可得到样品中冈田酸的浓度。吸光值与样品中冈田酸的浓度成负相关。
利用萃取液通过均质及振荡的方式提取样品中的腹泻性贝类毒素,再用缓冲液稀释,然后进行免疫测定。先将酶标记物加入到微孔中,再加入标准及样品,然后加入抗体进行反应。孵育30分钟后洗掉小孔中所有没有结合的分子。加入无色的底物溶液,培养30分钟,所有结合的酶标记物使底物转化成蓝色物质。加入停止液然后读取吸光度值,将未知浓度样品与标准吸光度值进行比较,就可以得到样品中腹泻性贝类毒素的浓度值。
腹泻性贝类毒素检测试剂盒检测原理:
测定的基础是抗原抗体反应,微孔板包被有针对腹泻性毒素(DSP)抗体的捕捉抗体,加入标准或样品溶液及腹泻性毒素(DSP)酶标记物,游离腹泻性毒素(DSP)与腹泻性毒素(DSP)酶标记物竞争腹泻性毒素(DSP)抗体,同时腹泻性毒素(DSP)抗体与捕捉抗体连接。没有结合的酶标记物在洗涤步骤中被除去。将底物和发色剂加入到孔中并且孵育。结合的酶标记物将无色的发色剂转化为蓝色的产物。加入反应停止液后使颜色改变。在450nm测量,吸光度与样品中的浓度成反比。