怎样使用*总量免疫亲和柱?
*总量免疫亲和柱测定的基础是抗原抗体反应。*是一类真菌(主要是黄曲霉和寄生曲霉)代谢的有毒产物,主要存在于谷物,坚果,棉籽以及一些与人类血液,动物饲料相关的产品中。*以AFB1、AFB2、AFG1和AFG2这四种毒素为主,*总量一般是指这四种毒素的总量。
它们是I类致癌物,被证明对人和动物的肝脏、肾脏等组织和器官具有很大的危害,是一类毒性很强的致癌物质。因此,必须对其进行及时检测监控,目前主要的检测手段是高效液相色谱法。本产品是基于免疫竞争法检测原理建立的一种快速准确提取净化样品中的黄曲霉总量方法。它具有简单、快速,无需特殊仪器设备等优势。
使用*总量免疫亲和柱的详细步骤如下:
1、连接:将免疫亲和柱后盖取下,用剪刀剪开,重新盖上,连接于泵流操作架的30mL注射器下;
2、上样:准确移取10mL样品提取液转移至注射器内,打开下端堵头;
3、富集:将空气压力泵与注射器连接,调节压力使样品提取液缓慢通过免疫亲和柱,建议重力过柱;
4、洗涤:用20mL蒸馏水分两次加压清洗,弃去全部流出液,并使2-3mL空气通过柱体;
5、洗脱: 为保证洗脱充分,建议以2.0mL色谱级甲醇分两步进行洗脱,重力洗脱即可。首先,将免疫亲和柱内液体排干,下端盖上堵头,加1.0mL甲醇于柱管内孵育60秒以上(孵育即甲醇在柱子中浸泡),重力过柱,当溶剂通过柱子后;再加入1.0mL甲醇重复上述洗脱步骤,之后轻微加压排净洗脱液,合并洗脱液供检测用。
好了,以上便是关于*总量免疫亲和柱的相关内容介绍了,您们都学会了吗?